ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА. «Определение полового Х-хроматина»

«Определение полового Х-хроматина»

Кроме кариотипирования цитогенетический метод позволяет определить половой хроматин: Х-хроматин и У-хроматин. Х-хроматин представляет собой инактивированную одну из двух Х-хромосом. В норме половой хроматин отсутствует у мужчин, так как их одна Х-хромосома всегда является активной. У женщин имеется две Х-хромосомы и одна из них находится в неактивном состоянии в виде Х-полового хроматина (тельца Барра). Таким образом определить количество Х-хромосом можно путём суммирования количество телец Бара + 1.

В настоящее время разработан простой способ определения Х-полового хроматина – соскоб слизистой оболочки полости рта (буккального эпителия).

Цель работы: научиться делать препарат буккального эпителия; анализировать препарат под микроскопом; подсчитывать количество клеток, имеющих половой хроматин.

Оснащение работы: микроскоп, шпатели, спирт, марлевые салфетки, краска - ацетоорсеин, стёкла: предметные и покровные.

Ход работы:

1) Приготовить предметное и покровное стекло: тщательно протереть их марлевой салфеткой.

2) Шпатель обработать спиртом и протереть салфеткой.

3) Протереть слизистую щеки и быстрым скользящим движением шпателя произвести соскоб.

4) Полученный материал перенести на предметное стекло и сделать тонкий мазок.

5) На мазок капнуть каплю 1 % ацетоорсеина и накрыть покровным стеклом. Сверху положить слой фильтровальной бумаги и слегка надавить пальцем в течение нескольких секунд. Удалить остатки краски. Не допустить сдвигание покровного стекла!

6) Изучение препарата производят в световом микроскопе с иммерсионной системой (× 1200 – 1500).

На препарате половой хроматин виден в виде тельца, окрашенного в тёмный цвет окружённого более светлым ореолом. Размер его около 1 мкм. Расположен чаще всего под ядерной мембраной. Форма полового хроматина может быть чаще всего овальной, треугольной, реже иной.

В норме половой хроматин определяется в среднем у 30 % клеток женщин. Поэтому необходимо просмотреть несколько полей зрения в разных местах препарата и просчитать не менее 100 ядер.

Сделать вывод о содержании Х-хроматина у обследованного и заполните таблицу.

Не нашли, что искали? Воспользуйтесь поиском: