Комплексонометрическое определение содержания общего кальция в сыворотке крови крупного рогатого скота

Сущность метода. Кальций составляет почти треть всех минеральных веществ в животном организме и играет исключительно важную роль. Основная масса кальция сосредоточена в костной ткани в виде фосфатов, карбонатов и фтористых соединений. В сыворотке крови 40% кальция связано с альбуминами в виде сложных комплексных соединений. Кальций, как двухвалентный катион, понижает возбудимость нервной системы, регулирует проницаемость клеточных мембран, возбуждает сердце, избирательно активирует либо тормозит функции некоторых ферментов, способствует свертыванию крови. Содержание кальция в сыворотке крови зависит от вида, возраста и физиологического состояния животного и является объективным показателем состояния минерального обмена и степени обеспеченности организма этим катионом.

Таблица 2.7.1. Содержание кальция в сыворотке крови разных видов животных

*Для пересчета мг% в моль/л (единицы СИ) результат умножают на 0,25.

Снижение концентрации кальция в крови (гипокальцемия) наблюдается при неполноценном кормлении, рахите, остеомаляции, нефрозах, родильном парезе, а повышение (гиперкальцемия) – при гипервитаминозе витамина D, гиперфункции передней доли гипофиза, метаболическом ацидозе, острой атрофии костей. Все это говорит о необходимости постоянного контроля за содержанием кальция в сыворотке крови животных.

Кальций образует с мурексидом (пурпурат аммония) комплексное соединение розового цвета. Под действием более сильного комплексообразователя трилона Б (ЭДТА или динатриевая соль этилендиаминтетрауксусной кислоты) мурексидокальциевый комплекс разрушается и образуется новый трилонкальциевый комплекс. Освобождающийся мурексид окрашивает раствор в сине-фиолетовый цвет. По количеству израсходованного на титрование трилона Б рассчитывают концентрацию кальция в сыворотке крови.

Ход работы. Разбавляют 2 мл сыворотки крови в 48 мл дистиллированной воды, добавляют 0,4 мл 9 н раствора гидроксида натрия и шпателем немного мурексида. Раствор принимает розовое окрашивание. Далее титруют 0,01 н раствором трилона Б до тех пор, пока окраска смеси не станет фиолетовой. Параллельно титруют контрольную пробу, используя вместо сыворотки дистиллированную воду. Записывают объем трилона Б, израсходованного на титрование контрольной и опытной пробы.

Обработка результатов. Содержание кальция в сыворотке крови (Х, мг%) рассчитывают по формуле:

Х = 0,2 ∙ (А - В) ∙ 50,

где 0,2 – количество мг кальция, которое соответствует 1 мл 0,01 н раствора трилона Б;

А – количество мл 0,01 н раствора трилона Б, пошедшего на титрование опытной пробы;

В – количество мл 0,01н раствора трилона Б, пошедшего на титрование контрольной пробы;

50 – коэффициент пересчета количества кальция на 100 мл сыворотки крови.

Не нашли, что искали? Воспользуйтесь поиском: