ТОР 5 статей: Методические подходы к анализу финансового состояния предприятия Проблема периодизации русской литературы ХХ века. Краткая характеристика второй половины ХХ века Характеристика шлифовальных кругов и ее маркировка Служебные части речи. Предлог. Союз. Частицы КАТЕГОРИИ:
|
Изучение влияния концентрации АТР на скорость гликолиза. 1. В соответствии с приведенной ниже таблицей готовят три пробирки: пробирку №1 – контрольная проба; пробирку №2 – инкубируемая проба; и пробирку №3 –1. В соответствии с приведенной ниже таблицей готовят три пробирки: пробирку №1 – контрольная проба; пробирку №2 – инкубируемая проба; и пробирку №3 – инкубируемая проба, содержащую АТР в ингибирующей концентрации.
2. Пробирки помещают на 5 мин в лед. 3. Во все три пробирки (не извлекая их изо льда) добавляют по 1.5 мл мышечного экстракта и тщательно перемешивают. 4. Пробу №1 оставляют на льду, а пробы №2 и 3 инкубируют в течение 30 мин при 26° С в водяной бане. 5. После инкубации пробы №2 и 3 переносят в лед. 6. Далее во всех пробах определяют содержание глюкозы и молочной кислоты, для этого с пробами поступают следующим образом: · из пробы №1 сразу же после добавления экстракта отбирают 0,5 мл инкубационной смеси и переносят в пробирку, содержащую 2,5 мл H2O, 2 мл 5% раствора ZnSO4×7H2O и 1 мл 0.3 М NaOH, и перемешивают; · к оставшейся в пробе №1 инкубационной смеси приливают равный объем 5% раствора ТХУ; · из проб №2 и 3 отбирают по 1 мл инкубационной смеси и переносят в пробирки, содержащие по 2 мл H2O, 2 мл 5% раствора ZnSO4×7H2O и 1 мл 0,3 М NaOH и также перемешивают; · к оставшимся в пробах №2 и 3 инкубационным смесям приливают равные объемы 5% раствора ТХУ; · образующиеся осадки белков во всех пробах (и осажденных цинковой смесью, и осажденных ТХУ) удаляют центрифугированием при 3 000 об/мин в течение 10 мин; · концентрацию глюкозы в супернатантах проб, осажденных цинковой смесью, определяют энзиматическим методом с глюкозооксидазой (методика описана ниже). · концентрацию молочной кислоты в супернатантах проб, осажденных ТХУ, определяют по реакции с п -оксидифенилом (методика описана ниже). 7. Об интенсивности гликолиза судят по убыли глюкозы и по приросту молочной кислоты. 8. Делают выводы о влиянии АТР на скорость гликолиза. Не нашли, что искали? Воспользуйтесь поиском:
|