ТОР 5 статей:
Методические подходы к анализу финансового состояния предприятия
Проблема периодизации русской литературы ХХ века. Краткая характеристика второй половины ХХ века
Характеристика шлифовальных кругов и ее маркировка
Служебные части речи. Предлог. Союз. Частицы
КАТЕГОРИИ:
- Археология
- Архитектура
- Астрономия
- Аудит
- Биология
- Ботаника
- Бухгалтерский учёт
- Войное дело
- Генетика
- География
- Геология
- Дизайн
- Искусство
- История
- Кино
- Кулинария
- Культура
- Литература
- Математика
- Медицина
- Металлургия
- Мифология
- Музыка
- Психология
- Религия
- Спорт
- Строительство
- Техника
- Транспорт
- Туризм
- Усадьба
- Физика
- Фотография
- Химия
- Экология
- Электричество
- Электроника
- Энергетика
Лабораторная работа
1. Проба Вельтмана
| Оборудование: | 1. | Штатив с пробирками. | ||
| 2. | Пипетки на 0,1 мл и 5 мл. | |||
| 3. | Спиртовка. | |||
| 4. | Держатель для пробирки. | |||
| . | ||||
| Реактивы: | 1. | 0,5% раствор СаСl2. | ||
| 2. | Дистиллированная вода. | |||
| 3. | Сыворотка крови. | |||
Принцип метода. Реакция основана на том, что белки сыворотки крови в результате нагревания и действия хлористого кальция определенной концентрации выпадают в виде хлопьев (происходит нарушение коллоидной устойчивости).
Ход работы. К 0,1 мл сыворотки добавляют 4,9 мл воды, перемешивают и прибавляют 0,1 мл 0,5% CaCl2. Встряхивают и нагревают пробирку над пламенем до однократного вскипания смеси. Пробирку охлаждают и смотрят на свет. Если хлопьев нет, то в эту же пробирку добавляют еще 0,1 мл CaCl2 и вновь кипятят. Процедуру повторяют, пока не выпадут хлопья. Результаты оценивают, подсчитывая общее количество пошедшего на реакцию CaCl2.
Диагностическое значение.
В норме коагуляция наступает при добавлении 0,4-0,5 мл CaCl2. При патологических процессах происходит нарушение соотношения белковых фракций крови, что приводит к изменению коллоидной устойчивости. При повреждениях печени, гемолизе и хронических воспалительных процессах коагуляция наступает при добавлении меньшего количества CaCl2, что обусловлено повышенным содержанием g-глобулинов. При острых воспалительных и экссудативных процессах, сахарном диабете, повреждении почек, злокачественных опухолях коагуляция наблюдается при добавлении большего количества СаСl2. Причина – увеличение содержания a- и b-глобулинов.
2. Осаждение белков кипячением
| Оборудование: | 1. | Штатив с пробирками. | |
| 2. | Пипетки на 0,1 мл, 1 мл и 5 мл. | ||
| 3. | Спиртовка. | ||
| 4. | Держатель для пробирки. | ||
| Реактивы: | 1. | Раствор белка. | |
| 2. | 1% раствор уксусной кислоты. | ||
| 3. | Насыщенный раствор NaСl. | ||
| 4. | 10% раствор NaOH. | ||
В 5 пробирок внести реактивы согласно схеме:
| Реактивы (мл) | Номера пробирок | Результат | Вывод | ||||
| Раствор белка | 1,0 | 1,0 | 1,0 | 1,0 | 1,0 | ||
| СН3СООН | - | 0,1 | 1,0 | 1,0 | - | ||
| NaCl насыщенный | - | - | 0,4 | - | - | ||
| 10% NaOH | - | - | - | - | 0,4 |
Все пробирки нагреть на спиртовке до кипения и записать, в каких из них выпадает осадок. Сопоставить результаты и сделать выводы. Объяснить, почему осадок появился не во всех пробирках.
Проверка качества усвоения знаний (конечный уровень)
А) Вопросы для защиты лабораторных работ
1. Как правильно работать со спиртовкой?
2. Как правильно нагревать пробирки в пламени спиртовки?
3. Что такое белки?
4. От чего зависит устойчивость растворов белка?
5. Что понимают под растворимостью белка?
6. Что такое рI белка?
7. Как изменяется растворимость белка в рI?
8, Как изменяется растворимость белка при сдвиге влево или вправо от рI?
9. Что значит кислый, основный и нейтральный белок?
10. Что такое денатурация белков? Какие факторы ее вызывают?
11. Чем денатурация отличается от гидролиза белков?
12. Что такое высаливание белков?
13. Чем высаливание отличается от денатурации?
14. Что такое электрофорез?
15. На какие фракции можно разделить белки плазмы крови с помощью электрофореза?
16. Какой принцип лежит в основе реакции Вельтмана?
17. От чего зависит коллоидная устойчивость белков?
18. При каких патологических состояниях коагуляция наступает при добавлении меньшего количества хлорида кальция?
19. При каких патологических состояниях коагуляция наступает при добавлении большего количества хлорида кальция?
20. При добавлении какого количества хлорида кальция коагуляция наступает в норме?
Не нашли, что искали? Воспользуйтесь поиском: