Розділення амінокислот методом ТШХ

Мета роботи: ознайомитись з прийомами ТШХ на прикладі розділення амінокислот – аланіна, гістидина, глутамінової кислоти.

Реактиви, посуд.

Розчини з масовими концентраціями амінокислот, r = 10^‑3 ґ /л.

Розчин нінгідрину (в етанолі або у суміші розчину оцтової кислоти, із масовою часткою w = 120 ґ/л, та н‑бутанолу, співвідношення об’ємів розчинників 1:19), із масовою часткою нінгідрину w = 0,2 %.

Льодяна оцтова кислота, бутанол.

Ділильні лійки, піпетки місткістю 10 мл та 1 мл (останні – з поділками), вимірювальні циліндри місткістю» 10 мл, хроматоґрафічні пластинки, капіляри, камера для хроматоґрафування (хімічна склянка із кришкою із листового скла).

Хроматоґрафування.

Методика нанесення проби та стандартних розчинів й хроматоґрафування така ж, як у попередній роботі. Оскільки розчини вихідних речовин є водяними, а швидкість випаровування води порівняно низька, зверніть особливу увагу на висушування крапель вихідних розчинів, що нанесені на стартову лінію. Корисно підігріти вихідні плями у теплому повітрі. Об’єми всіх розчинів дорівнюють 5 мкл. Елюентом є суміш льодяної оцтової кислоти з водою та бутанолом, у об’ємному відношенні 1:1:3. Коли фронт просунеться на» 15 см, процес припиніть, пластинку висушіть при 100-105 ^оС протягом 15 хв. Плями переведіть у забарвлені, оприскуючи пластинку розчином нінгідрину. Порівнюючи R_f для стандартів та об’єкту, зробіть висновок про якісний склад останнього.

Не нашли, что искали? Воспользуйтесь поиском: