ТОР 5 статей: Методические подходы к анализу финансового состояния предприятия Проблема периодизации русской литературы ХХ века. Краткая характеристика второй половины ХХ века Характеристика шлифовальных кругов и ее маркировка Служебные части речи. Предлог. Союз. Частицы КАТЕГОРИИ:
|
Заливка ткани в парафинЗАЛИВОЧНЫЕ СРЕДЫ Для получения тонких (до 6 мкм) гистологических срезов необходимо фиксированный и промытый материал залить в плотную среду, предварительно пропитав ею кусочки тканей. В зависимости от способа растворения все заливочные среды разделяют на растворимые в органических растворителях и водорастворимые. К первым относятся парафин, пластические полимеры на основе парафина, целлоидин, ко вторым — желатин, полиэтиленгликоли, полиэфиры, некоторые метакрилаты и т.д. Заливка ткани в парафин Парафин — смесь высокомолекулярных предельных углеводородов, продукт перегонки нефти; растворяется в анилине, бензоле, бергамотном масле, целлозольве, хлороформе, декалине, диоксане, бутаноле, пропаноле, толуоле, трихлорэтилене, ксилоле. Каждый из этих растворителей можно использовать в качестве промежуточной среды между спиртом и парафином. Температура плавления различных парафинов от 27 до 62 °С. В гистологической технике применяют парафин с температурой плавления 56 °С. Зарубежные фирмы производят специальный парафин для гистологических исследований, содержащий различные пластические полимеры, такие как диметилсульфоксид. Их коммерческие названия «Парапласт», «Парапласт плюс», «Гистопласт С», «Гистозес». Важнейшим условием успешной заливки материала является своевременная смена реактивов в процессе их загрязнения, а также соблюдение рекомендуемых временных и температурных параметров. Кроме того, нужно стремиться к тому, чтобы одновременно заливать одинаковые по толщине и плотности кусочки ткани.
Другие способы заливки.
Наиболее быстрым, простым, не требующим применения специальной аппаратуры методом заливки материала является способ, разработанный И. И. Золотых в патологоанатомическом отделении Института хирургии им. А. В. Вишневского. 96 % спирте 15 мин 100 % Спирт 15 мин Хлороформ 15 мин Хлороформ-парафин при 56 °С15 мин Парафин при 56 °С, энергично встряхивая 1 мин Парафин при 56 °С 45 мин Продолжительность 2 ч 30 мин У нас заливка проходит следующим образом: Формалин 10% 24 часа Промывка проточной водой 1 час спирт 70% (обезвоживание) больше 4 часов спирт 80% больше 4 часов спирт 96% больше 4 часов спирт+хлороформ 1:1 до 1 часа(пересушивается) хлороформ чистый до 1 часа хлороформ чистый до 1 часа хлороформ+парафин 1:1 37С до 1 часа парафин 1 56С 45 м парафин 2 56С 45 м в блоки. Для приготовления препаратов следует: ксилол 1 (депарафинизация) 56С 10 м ксилол 2 56С 10 м фильтровальная бумага(промокашка) спирт 96% 5 м спирт 70% 5 м фильтровальная бумага гематоксилин 5 м промываем дистиллированной водой эозин до 2 м вода водопроводная спирт макнуть фильтровальная бумага ксилол 56С больше 10 м (для просветления)
Не нашли, что искали? Воспользуйтесь поиском:
|