ТОР 5 статей:
Методические подходы к анализу финансового состояния предприятия
Проблема периодизации русской литературы ХХ века. Краткая характеристика второй половины ХХ века
Характеристика шлифовальных кругов и ее маркировка
Служебные части речи. Предлог. Союз. Частицы
КАТЕГОРИИ:
- Археология
- Архитектура
- Астрономия
- Аудит
- Биология
- Ботаника
- Бухгалтерский учёт
- Войное дело
- Генетика
- География
- Геология
- Дизайн
- Искусство
- История
- Кино
- Кулинария
- Культура
- Литература
- Математика
- Медицина
- Металлургия
- Мифология
- Музыка
- Психология
- Религия
- Спорт
- Строительство
- Техника
- Транспорт
- Туризм
- Усадьба
- Физика
- Фотография
- Химия
- Экология
- Электричество
- Электроника
- Энергетика
Техника безопасности. 1. До включения прибора в сеть проверить наличие заземления.
1. До включения прибора в сеть проверить наличие заземления.
2. Не оставлять КФК-2 и гальванометр включенными без надобности.
3. Следить за чистотой прибора.
4. Осторожно обращаться с кюветами.
РАБОТА 11. КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ БЕЛКА
В СЫВОРОТКЕ КРОВИ БИУРЕТОВЫМ МЕТОДОМ
Белки в щелочной среде реагируют с сульфатом меди с образованием комплексных соединений, окрашенных в сине-фиолетовый или красно-фиолетовый цвет. Интенсивность окраски пропорциональна содержанию белка в растворе.
Ход работы.
1. Построение калибровочной кривой
Готовят семь рабочих стандартных растворов белка разведением основного стандартного раствора (содержит 4 мг белка в 1 мл) дистиллированной водой, как указано в таблице:
| № проб | Стандартный раствор, мл | Н2О, мл | Содержание белка в пробе, мл | Е |
| 0,25 | 1,75 | 1,0 | ||
| 0,50 | 1,50 | 2,0 | ||
| 0,75 | 1,25 | 3,0 | ||
| 1,00 | 1,00 | 4,0 | ||
| 1,25 | 0,75 | 5,0 | ||
| 1,50 | 0,50 | 6,0 | ||
| 1,75 | 0,25 | 7,0 | ||
| Контроль | - | 2,00 | - | - |
Для приготовления контрольной пробы в пробирку наливают
2 мл дистиллированной воды. Во все рабочие стандартные растворы и контроль добавляют по 2,5 мл биуретового реактива, перемешивают и оставляют при комнатной температуре на 30 минут для развития окраски. Окрашенные стандартные растворы колориметрируют на КФК-2 против контроля в кюветах на 5 мл с зеленым светофильтром (длина волны 540 нм). Полученные значения оптической плотности используют для построения калибровочной кривой.
2. Количественное определение белка в сыворотке крови
Исследуемую сыворотку крови разбавляют дистиллированной водой в 40 раз (1мл сыворотки смешивают с 39 мл Н2О). К 2 мл разбавленной сыворотки добавляют 2,5 мл биуретового реактива и после перемешивания оставляют при комнатной температуре на 30 минут, а затем колориметрируют.
Контрольная проба вместо сыворотки содержит 2 мл дистиллированной воды. Измерение оптической плотности производится так же, как при построении калибровочной кривой.
Оформление работы
1. Записать величины оптической плотности стандартных растворов в виде таблицы:
| № пробы | Содержание белка в пробе (мг) | Е1 | Е2 | Е3 | Еср. |
Е1, Е2, Е3 - значения оптической плотности одного стандартного раствора, полученные разными студентами.
2. Построить калибровочную кривую.
3. Рассчитать содержание белка в исследуемой сыворотке крови и сделать выводы.
|
|
Не нашли, что искали? Воспользуйтесь поиском: