ТОР 5 статей: Методические подходы к анализу финансового состояния предприятия Проблема периодизации русской литературы ХХ века. Краткая характеристика второй половины ХХ века Характеристика шлифовальных кругов и ее маркировка Служебные части речи. Предлог. Союз. Частицы КАТЕГОРИИ:
|
Техника безопасности. 1. До включения прибора в сеть проверить наличие заземления.1. До включения прибора в сеть проверить наличие заземления. 2. Не оставлять КФК-2 и гальванометр включенными без надобности. 3. Следить за чистотой прибора. 4. Осторожно обращаться с кюветами.
РАБОТА 11. КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ БЕЛКА В СЫВОРОТКЕ КРОВИ БИУРЕТОВЫМ МЕТОДОМ Белки в щелочной среде реагируют с сульфатом меди с образованием комплексных соединений, окрашенных в сине-фиолетовый или красно-фиолетовый цвет. Интенсивность окраски пропорциональна содержанию белка в растворе. Ход работы. 1. Построение калибровочной кривой Готовят семь рабочих стандартных растворов белка разведением основного стандартного раствора (содержит 4 мг белка в 1 мл) дистиллированной водой, как указано в таблице:
Для приготовления контрольной пробы в пробирку наливают 2 мл дистиллированной воды. Во все рабочие стандартные растворы и контроль добавляют по 2,5 мл биуретового реактива, перемешивают и оставляют при комнатной температуре на 30 минут для развития окраски. Окрашенные стандартные растворы колориметрируют на КФК-2 против контроля в кюветах на 5 мл с зеленым светофильтром (длина волны 540 нм). Полученные значения оптической плотности используют для построения калибровочной кривой. 2. Количественное определение белка в сыворотке крови Исследуемую сыворотку крови разбавляют дистиллированной водой в 40 раз (1мл сыворотки смешивают с 39 мл Н2О). К 2 мл разбавленной сыворотки добавляют 2,5 мл биуретового реактива и после перемешивания оставляют при комнатной температуре на 30 минут, а затем колориметрируют. Контрольная проба вместо сыворотки содержит 2 мл дистиллированной воды. Измерение оптической плотности производится так же, как при построении калибровочной кривой.
Оформление работы 1. Записать величины оптической плотности стандартных растворов в виде таблицы:
Е1, Е2, Е3 - значения оптической плотности одного стандартного раствора, полученные разными студентами. 2. Построить калибровочную кривую. 3. Рассчитать содержание белка в исследуемой сыворотке крови и сделать выводы. Не нашли, что искали? Воспользуйтесь поиском:
|