Главная | Случайная
Обратная связь

ТОР 5 статей:

Методические подходы к анализу финансового состояния предприятия

Проблема периодизации русской литературы ХХ века. Краткая характеристика второй половины ХХ века

Ценовые и неценовые факторы

Характеристика шлифовальных кругов и ее маркировка

Служебные части речи. Предлог. Союз. Частицы

КАТЕГОРИИ:






Техника безопасности. 1. До включения прибора в сеть проверить наличие заземления.




1. До включения прибора в сеть проверить наличие заземления.

2. Не оставлять КФК-2 и гальванометр включенными без надобности.

3. Следить за чистотой прибора.

4. Осторожно обращаться с кюветами.

 

 

РАБОТА 11. КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ БЕЛКА

В СЫВОРОТКЕ КРОВИ БИУРЕТОВЫМ МЕТОДОМ

Белки в щелочной среде реагируют с сульфатом меди с образованием комплексных соединений, окрашенных в сине-фиолетовый или красно-фиолетовый цвет. Интенсивность окраски пропорциональна содержанию белка в растворе.

Ход работы.

1.Построение калибровочной кривой

Готовят семь рабочих стандартных растворов белка разведением основного стандартного раствора (содержит 4 мг белка в 1 мл) дистиллированной водой, как указано в таблице:

 

№ проб Стандартный раствор, мл Н2О, мл Содержание белка в пробе, мл Е
0,25 1,75 1,0  
0,50 1,50 2,0  
0,75 1,25 3,0  
1,00 1,00 4,0  
1,25 0,75 5,0  
1,50 0,50 6,0  
1,75 0,25 7,0  
Контроль - 2,00 - -

 

Для приготовления контрольной пробы в пробирку наливают

2 мл дистиллированной воды. Во все рабочие стандартные растворы и контроль добавляют по 2,5 мл биуретового реактива, перемешивают и оставляют при комнатной температуре на 30 минут для развития окраски. Окрашенные стандартные растворы колориметрируют на КФК-2 против контроля в кюветах на 5 мл с зеленым светофильтром (длина волны 540 нм). Полученные значения оптической плотности используют для построения калибровочной кривой.

2. Количественное определение белка в сыворотке крови

Исследуемую сыворотку крови разбавляют дистиллированной водой в 40 раз (1мл сыворотки смешивают с 39 мл Н2О). К 2 мл разбавленной сыворотки добавляют 2,5 мл биуретового реактива и после перемешивания оставляют при комнатной температуре на 30 минут, а затем колориметрируют.

Контрольная проба вместо сыворотки содержит 2 мл дистиллированной воды. Измерение оптической плотности производится так же, как при построении калибровочной кривой.

 

Оформление работы

1. Записать величины оптической плотности стандартных растворов в виде таблицы:

 

№ пробы Содержание белка в пробе (мг) Е1 Е2 Е3 Еср.

 

Е1, Е2, Е3 - значения оптической плотности одного стандартного раствора, полученные разными студентами.

2. Построить калибровочную кривую.

3. Рассчитать содержание белка в исследуемой сыворотке крови и сделать выводы.







Не нашли, что искали? Воспользуйтесь поиском:

vikidalka.ru - 2015-2021 год. Все права принадлежат их авторам! Нарушение авторских прав | Нарушение персональных данных