Главная | Случайная
Обратная связь

ТОР 5 статей:

Методические подходы к анализу финансового состояния предприятия

Проблема периодизации русской литературы ХХ века. Краткая характеристика второй половины ХХ века

Ценовые и неценовые факторы

Характеристика шлифовальных кругов и ее маркировка

Служебные части речи. Предлог. Союз. Частицы

КАТЕГОРИИ:






Техника безопасности. Будьте внимательны при работе с 10% щелочью натрия и дифениламиновым реактивом.




Будьте внимательны при работе с 10% щелочью натрия и дифениламиновым реактивом.

 

 

РАБОТА 15. КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ РИБОЗЫ

ПО МЕТОДУ МЕЙБАУМА

Рибоза входит в состав РНК, нуклеотидов и некоторых коферментов. Существуют колориметрические методы определения содержания указанных веществ, основанные на количественном определении рибозы.

Метод Мейбаума основан на способности рибозы к дегидратации с образованием фурфурола, дающего с орцином соединение, окрашенное в сине-зеленый цвет. Интенсивность окраски пропорциональна содержанию рибозы.

Ход работы

1. Построение калибровочной кривой

В пять сухих пробирок вносят основной стандартный раствор рибозы (содержит 12,5 мкг рибозы в 1 мл) и дистиллированную воду в количествах, указанных в таблице:

 

№ проб Стандартный раствор (мл) Н2О (мл) Количество рибозы в пробе (мкг)
0,2 0,8 2,5
2 0,4 0,6 5,0
0,6 0,4 7,5
0,8 0,2 10,0
1,0 - 12,5

В контрольную пробирку наливают 1 мл дистиллированной воды. Во все пробирки добавляют автоматической пипеткой по

1 мл орцинового реактива, перемешивают и помещают в кипящую

водяную баню на 20 минут. Затем пробирки охлаждают под струей холодной воды, добавляют по 3 мл дистиллированной воды и содержимое перемешивают. Рабочие стандартные растворы

колориметрируют на КФК-2 против контроля в кюветах на 10 мл с красным светофильтром (длина волны 670 нм). Результаты определения оптической плотности используют для построения калибровочной кривой.

2. Определение количества рибозы в исследуемомрастворе

К 1 мл исследуемого раствора рибозы добавляют 1 мл орцинового реактива и далее анализ проводят так же, как при построении калибровочной кривой.

Концентрацию рибозы находят по калибровочной кривой.

 

 

Оформление работы

1. Результаты измерения оптической плотности стандартных растворов записать в таблицу:

 

№ проб Содержание рибозы в пробе (мкг) Е1 Е2 Е3 Е ср.

 

Е1, Е2, Е3 - значения оптической плотности одного стандартного раствора, полученные разными студентами.

2. Построить калибровочную кривую.

3. Записать, какое количество рибозы оказалось в исследуемом растворе ( в мкг/мл).

 

 







Не нашли, что искали? Воспользуйтесь поиском:

vikidalka.ru - 2015-2021 год. Все права принадлежат их авторам! Нарушение авторских прав | Нарушение персональных данных