Методика определения влияния желчи на активность липазы.

1. Около 5г. измельченной поджелудочной железы помещают в ступку и тщательно растирают в 10 –16 мл. воды в течение 4 –5 мин.

2. Полученную смесь отфильтровывают в пробирку через 2 –3 слоя марли.

3. Готовят 3 колбы – 2 опытных и контрольную. В них смешивают

препарат липазы и субстрат (молоко), как указанно в таблице:

4. Колбы тщательно перемешивают. Затем добавляют по 2 капли раствора фенолфталеина и титруют 0,1 н раствором гидроксида натрия до слабо –розового окрашивания.

5. Затем пробирки помещают в термостат, температура которого 38˚-40˚С и через определенные интервалы времени (15,30, 45 мин) вынимают их и титруют 0,1н раствором гидроксида натрия.

Результаты первого тестирования, полученные до начала действия липазы вычитают из результатов предыдущих титрований.

6. На основании полученных данных строят график, где по оси абцисс откладывают время в мин., а по оси ординат – активность липазы, выраженную объемом 0,1н раствора NaOH, пошедшего на нейтрализацию жирных кислот, образовавшихся за данный промежуток времени. Сравнивают активность липазы в присутствии желчи и без неё, делают выводы.

Не нашли, что искали? Воспользуйтесь поиском: