Методы культивирования вирусов. Понятие о первичных и перевиваемых культурах клеток.

На первом этапе развития вирусологии единственным методом,доказывающим наличие фильтрующихся инфекционных агентов в исследуемом материале, служило заражение лабораторных животных. В 1931 г. в вирусологической практике стали использоваться куриные эмбрионы для репродукции вирусов с диагностическими целями, а также для производства вирусных вакцин. Позднее были разработаны культуры клеток, приготовленные из неперевиваемых, перевиваемых и полуперевиваемых линий нормальных или злокачественных клеток людей и животных. Они нашли Общая вирусология 83 широкое применение для диагностических, научных и производственных целей. Неперевиваемые— первичные клетки не способны размножаться in vitro, вследствие чего они годятся только для однократного использования. Полуперевиваемые культуры представляют собой диплоидные клетки человека, способные к размножению in vitro в течение 50 пассажей (до 1 года). Они, как правило, не претерпевают злокачественного перерождения. Перевиваемые культуры Злокачественных или нормальных клеток длительно размножаются in vitro. Они могут сохраняться в течение длительных сроков (десятилетиями), например культура клеток Hela и др. Недостаток клеточных культур состоит в возможности их контаминации неизвестными вирусами и микоплазмами. О репродукции вирусов в культурах клеток судят по их цито- и э т и ч е с к о м у д ейс т в и ю (ЦПД), которое носит разный характер в зависимости от вида вируса (рис. 5.10), по бляшкообра- юванию на клеточном монослое, покрытом тонким агаровым слоем (рис. 5.11), гемадсорбции эритроцитов и другим тестам.__

Таким образом, индикация вирусов производится микроскопически по наличию ЦПД, бляшкообразованию на клеточном монослое, ге- мадсорбции эритроцитов, добавленных к клеточной культуре вируса, а также в реакции гемагглютинации с исследуемым вируссодержащим материалом. Реакцию гемагглютинации вызывают вирусы, содержащие в составе своего капсида или суперкапсида гемагглютинин.

Не нашли, что искали? Воспользуйтесь поиском: