ТОР 5 статей: Методические подходы к анализу финансового состояния предприятия Проблема периодизации русской литературы ХХ века. Краткая характеристика второй половины ХХ века Характеристика шлифовальных кругов и ее маркировка Служебные части речи. Предлог. Союз. Частицы КАТЕГОРИИ:
|
Микроклональное размножение и оздоровление растений
Известно, что успех клонального микроразмножения зависит от меристематического экспланта, его размера и строения. При этом отмечается закономерность: чем больше листовых зачатков и тканей, тем легче идут процессы морфогенеза, которые заканчиваются образованием целого растения. Вместе с тем, при таком развитии конуса нарастания увеличивается риск быстрого транспорта вируса по проводящей системе. Кроме того, даже небольшой меристематический эксплант может содержать вирусы, проникшие в клетки в результате медленного проникновения через плазмодесмы. В целом, эффективность применения апикальной меристемы в качестве метода оздоровления зараженных вирусами растений может оказаться довольно низкой. Снизить риск попадания вирусов в здоровые ткани можно путем применения предварительной термо- или химиотерапии исходных растений.
- Хранение и криосохранение изолированных клеток, тканей и органов. Методы сохранения генофонда - цель исследователей состоит в увеличении интервала между пересадками. Существует разные подходы к сохранению клеточных культур растений: – Криосохранение – замораживание при сверхнизких температурах. Обычно его проводят в жидком азоте, при температуре – 196 oC. – замедление роста. Для замедления роста большинства культур необходимы факторы, ограничивающие рост. Можно использовать следующие методы: 1 Хранение под слоем минерального масла (для бактериальных и грибных культур). 2 Изменение газового состава и атмосферного давления внутри культурального сосуда. Чаще всего снижение в нем содержания кислорода (гипоксия), например, выращивание в атмосфере, состоящей из смеси азота (90%) и кислорода (10%). Кроме того, задержку роста можно вызвать, снижая атмосферное давление до 0,014 мм ртутного столба или комбинируя пониженное давление и гипоксию. 3 Изменение светового режима. 4 Охлаждение до температуры прекращения активного роста с использованием в том числе обычных холодильников. Это обычно низкие положительные температуры, для разных культур варьирующие от + 2 до + 10 0С. Период без пересадок можно удлинить до 6-24 месяцев. Данный метод является основным способом получения минимального роста в культуре тканей, используемым для поддержания коллекции из 500 образцов вегетативно размножаемых растений во Всероссийском институте растениеводства им. Н.И.Вавилова (ВИР, Россия, г. Санкт-Петербург) и коллекции клеточных культур (более 2 000 клеточных линий) в Институте клеточной биологии и генетической инженерии НАН Украины (Украина, г. Киев). 5. Применение ретардантов* (соединений, способных замедлять рост): гормональных и осмотических ингибиторов. Из гормональных ингибиторов наиболее часто используют хлорхолинхлорид (ХХХ – для растительных клеток), абсцизовую кислоту (АБК), из осмотических – маннит в концентрации 3 – 6%, сорбит, активированный уголь. * Биологически активные вещества, способные задерживать процесс роста клетки растяжением, объединены под общим названием ретарданты (английское to retard — задерживаю). Эти соединения имеют различную химическую структуру, но обладают одинаковой биологической активностью, выражающейся в задержке деления и растяжения клеток в субапикальной меристеме. Однако полностью рост не останавливается, верхушечная меристема продолжает функционировать. В результате формируются укороченные и утолщенные стебли, перераспределяются пластические вещества между стеблем и репродуктивными органами, более интенсивно формируются структурные элементы, слагающие урожай. 6. Замена СaCl2 на Ca(NO3)2 в питательных средах. 7. Культивирование при оптимальных условиях роста, с периодичностью пассирования материала каждые 3–5–9–12 месяцев, в зависимости от культуры и конкретного клона. 8. Для картофеля в качестве способа, позволяющего сохранить генофонд, рекомендуется клубнеобразование в пробирках. Многие из перечисленных методов минимизации роста растений в культуре тканей применяются очень редко. Они находятся на стадии экспериментальных разработок протоколов, поскольку не изучено их влияние на стабильность генотипов растений. Публикации по данному вопросу немногочисленны. Обычное время хранения культур с ограниченным ростом составляет около года. Снижение скорости роста ниже некоторой точки приводит к гибели культуры. Таким образом, если полностью отказаться от пересаживания культуры, необходимо использовать такой способ хранения, при котором происходит полная остановка метаболизма.
Не нашли, что искали? Воспользуйтесь поиском:
|