Методы экспресс-диагностики распространенных вирусных инфекций

Окончание табл. 4

Материалом исследования при заболеваниях, сопровождающихся диареей или др. расстройствами жкт (гепатит А, рота- и энтеровирусные инфекции), являются свежие порции фекалий. При заболеваниях дыхат. системы (грипп, парагрипп, аденовирусная инф.) материал получают путем аспирации слизи, смывов, мазки из носоглотки. При наличии везикулярной сыпи (герпес) материал для исследования ж-ть, аспирированная иглой из везикул. При петехиальной и макуло-папулёзной сыпи —пробы слизи из носоглотки, фекалии. При подозрении на нейровирусные инф. (полиомиелит, арбовирусные инф.) следует забирать слизь из носоглотки, фекалии и спинномозговую ж-ть. Для диагностики эпидемического паротита и бешенства материалом служит слюна. При подозрении на цитомегало- и паповавирусные инф.материал- моча. Выделение вируса из кр. при подозрении на инф., вызванные арбовирусами, вирусами герпеса. Биопсия мозга может быть проведена при диагностике герпетического энцефалита, ПСПЭ, прогрессирующего краснушного панэнцефалита, болезни Крейтцфельдта-Якоба, лейкоспонгиоза.

Препараты слизи из носоглотки или фекалии помещаются в среду для транспортировки, состоящую из физ. р-ра с добавлением а\б и небольшого кол-ва сыворотки животных. Материалы хранятся при t 4°С не боле 48 часов. Более длительное хранение требует температуры –70°С.

Индикация вирусов в культуре клпроводится по ЦПД, РИФ, РГА, РГАдс. Многие энтеровирусы вызывают раннее ЦПД (через несколько часов). Цитомегаловирусы, аденовирусы, вирус краснухи вызывают ЦПД через несколько недель, а иногда необходимо прибегать к получению субкультуры. Присутствие синцития свидетельствует о наличии таких вирусов, как РС, кори, эпидемического паротита, герпесвирусов.

Идентификация вирусов проводится с помощью серологических методов(РТГА, РН, РТГАдс, используются только при вирусных инфекциях. РСК, РПГА, ИФА, РИА, ИФ, РП используются для диагностики как вирусных инф., так и инф, вызванных другими возбудителями). На схемах 2 и 3 представлена вирусологическая диагностика ОРВИ и кишечных инфекций.

3 группа — серологическая диагностика вирусных инфекций.

В большинстве случаев для серологической диагностики требуются парные сыворотки, взятые в острой фазе заболевания и спустя 2-4 недели. Обнаружение четырехкратного и более повышения титра антител принято рассматривать в качестве диагностического признака острой вирусной инфекции.

Схема 3. Выделение вирусов из фекалий, их индикация и идентификация
при кишечных вирусных инфекциях

4 группа — молекулярно-биологические методы индикации, идентификации и клонирования вирусов. Проводятся с целью выявления вирусспецифических фрагментов генома вирусов в материале.

Молекулярно-биологическая индикация вирусов в биологическом материале (дот блоттинг, in sinu гибридизация, сэндвич гибридизация):

– Методы молекулярной гибридизации (метод микрогенов). Проводятся с целью выявления вирусспецифических фрагментов генома вируса. Хар-ся высокой чувствительностью и специфичностью. Используются для выявления цитомегаловирусов, вирусов герпеса, вирусов гепатита.

– Полимеразная цепная реакция (ПЦР): проведение индикации вирусов, идентификации, дифференциации с родственными инф.агентами, генотипирование изолятов вирусов и клонирование фрагментов их генома.

– Вестерн-блоттинг — основан на выявлении циркулирующих в крови специфических АТ к АГ вируса.

– Определение инфицированных вирусом клеток методом проточной цитофлюориметрии. Используется при ВИЧ-инфекции, инфекционном мононулеозе, гепатите С, цитомегаловирусной инфекции.

Не нашли, что искали? Воспользуйтесь поиском: