Методы диагностики микозов

Забор материала со свежих развившихся поражений, где больше элементов гриба. Пораженные волосы берутся эпиляционным пинцетом. Элементы гладкой кожи, чешуйки - скальпелем. При поражении ногтей - соскоб скальпелем или отрезается кусочек маникюрными ножницами. Соскобы со слизистой оболочки берутся шпателем. Все остальные материалы - как обычно (при бактериологическом исследовании).

Микроскопическое исследование

Исследуют: - неокрашенные (нативные) окрашенные препараты. Предварительно материал просветляется. Для этого материал обрабатывают щелочью (10-30%) в течение 20 минут. Можно также производить просветление материала разведением в физрастворе. Чтобы сконцентрировать материал, его центрифугируют.

Нативные препараты. Каплю материала наносят на предметное стекло, затем добавляют раствор Люголя и спиртовой раствор глицерина (по 50% каждого). Накрывают покровным стеклом и исследуют в фазовоконтрастном или световом микроскопе.

Окрашенные препараты готовят обычным способом, окрашивают по Граму, ЦильНильсену, Романовскому-Гимзе и специальными методами. Фиксация - только жидким фиксатором.

Микологическое исследование включает все этапы культурального метода: выделение чистой культуры и идентификацию. Для удаления бактериальной флоры материал предварительно обрабатывают антибиотиками широкого спектра действия. Засевают на специальные среды с кислой рН и культивируют при пониженной температуре (26 - 30⁰ С). Колонии вырастают через несколько дней. Их изучают под малым и большим увеличением микроскопа. Идентификация - на основании морфологических признаков.

Большинство питательных сред для грибов готовится на основе среды Сабуро (водо-проводная вода + агар-агар + пептон + мальтоза).

Экспериментальный метод применяется для оценки патогенности выделенного гриба-возбудителя. При заражении используют чистые культуры или патологический материал. Подбор животных, техника введения материала, этапы работы - такие же, как в бактериологии.

Иммунологические исследования. (серологический и аллергический методы) - такие же, как в бактериологии.

Гистологическое исследование. - такое же, как в бактериологии (мазки-отпечатки, срезы), но изучают не только морфологию гриба, но и реакцию ткани на возбудителя, глубину поражения.

Лабораторная диагностика поверхностных микозов (кератомикозов, дерматомикозов)

1. Микроскопия патологического материала.

2. Выделение чистой культуры гриба и идентификация по морфологии.

Лабораторная диагностика кандидомикоза.

1. Микроскопия патологического материала.

2. Выделение чистой культуры: производится количественный посев материала несколько раз с промежутками в 5-7 дней. Если кандиды обнаруживаются многократно в количестве 10 53 0 на г. исследуемого материала и более, то диагноз кандидомикоза подтверждается.

3. Серологический метод: используется РСК и РА (диагностический титр антител 1:160) и РПГА (1:1600). Ставят также РП с белковыми и полисахаридными антигенами кандид.

4. Аллергический метод (кожные пробы по типу реакции Манту).

5. Выделенная культура проверяется на вирулентность на белых мышах. Если доза до 1 млн. клеток кандид вызывает гибель мыши, культура считается вирулентной.

Лабораторная диагностика глубоких микозов.

А. Криптококкоз:

1. Микроскопия патологического материала.

2. Выделение чистой культуры.

3. Серологическая диагностика (РА, РП, РСК, РПГА). Эти реакции редко бывают положительными.

4. Выявление криптококкового антигена в крови и ликворе больных с помощью РП.

5. Заражение белых мышей.

Б. Кокцидиоидоз:

1. Микроскопия патологического материала.

2. Выделение чистой культуры.

3. Серологическая диагностика:

с 2 недель до 4 месяцев выявляют антитела в РП,

с 4 месяцев и позже ставят РСК (диагностические титры 1:4 - 1:32).

4. Кожные пробы с кокцидиоидином (в разведении 1:100 и 1:1000). Проба положительная, если через 24-48 часов эритема больше 0,5 см.

В. Гистоплазмоз:

1. Микроскопия патологического материала.

2. Выделение чистой культуры.

3. Серологическая диагностика: первые три месяца в РСК и РП выявляются анти-h-антитела (это острый процесс). Позже 3 месяцев в РСК и РА выявляют анти-m-антитела (хронический процесс).

4. Кожная проба с гистоплазмином.

Не нашли, что искали? Воспользуйтесь поиском: