Главная

Популярная публикация

Научная публикация

Случайная публикация

Обратная связь

ТОР 5 статей:

Методические подходы к анализу финансового состояния предприятия

Проблема периодизации русской литературы ХХ века. Краткая характеристика второй половины ХХ века

Ценовые и неценовые факторы

Характеристика шлифовальных кругов и ее маркировка

Служебные части речи. Предлог. Союз. Частицы

КАТЕГОРИИ:






ПОЛИМЕРАЗНАЯ ЦЕПНАЯ РЕАКЦИЯ (ПЦР) В ДИАГНОСТИКЕ ИНФЕКЦИОННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ




Полимеразная цепная реакция (ПЦР), являющаяся одним из методов ДНК-диагности­ки, позволяет увеличить число копий детектируемого участка генома (ДНК) бактерий или вирусов в миллионы раз с использованием фермента ДНК-полимеразы. Тестируемый спе­цифический для данного генома отрезок нуклеиновой кислоты многократно умножается (амплифицируется), что позволяет его идентифицировать. Сначала молекула ДНК бактерий или вирусов нагреванием разделяется на 2 цепи, затем в присутствии синтезированных ДНК-праймеров (последовательность нуклеотидов специфична для определяемого генома) происходит связывание их с комплементарными участками ДНК, синтезируется вторая цепь нуклеиновой кислоты вслед за каждым праймером в присутствии термостабильной ДНК-полимеразы. Получается две молекулы ДНК. Процесс многократно повторяется. Для диагностики достаточно одной молекулы ДНК, т.е. одной бактерии или вирусной частицы. Введение в реакцию дополнительного этапа — синтеза ДНК на молекуле РНК при помощи фермента обратной транскриптазы — позволило тестировать РНК-вирусы, например вирус гепатита С. ПЦР — это трехступенчатый процесс, повторяющийся циклично: денатурация, отжиг праймеров, синтез ДНК (полимеризация). Синтезированное количество ДНК иден­тифицируют методами иммуноферментного анализа или электрофореза.

В ПЦР может быть использован различный биологический материал — сыворотка или плазма крови, соскоб из уретры, биоптат, плевральная или спинномозговая жидкость и т.д. В первую очередь ЦПР применяют для диагностики инфекционных болезней, таких, как ви­русные гепатиты В, С, D, цитомегаловирусная инфекция, инфекционные заболевания, пере­дающиеся половым путем (гонорея, хламидийная, микоплазменная, уреаплазменная инфек­ции), туберкулез, ВИЧ-инфекция и т.д. ПЦР используют также для диагностики злокачест­венных заболеваний, например ретинобластомы, В-клеточной лимфомы. Этот метод реко­мендуется и для диагностики наследственных заболеваний, дородового определения пола плода, ДНК-дактилоскопии в криминалистике, проведения санитарно-гигиенических иссле­дований объектов питания и водоснабжения.

Преимущество ПЦР в диагностике инфекционных заболеваний перед другими метода­ми исследований заключается в следующем:

— возбудитель инфекции может быть обнаружен в любой биологической среде организ­
ма, в том числе и материале, получаемом при биопсии;

— возможна диагностика инфекционных болезней на самых ранних стадиях заболева­
ния;

— возможность количественной оценки результатов исследований (сколько вирусов или
бактерий содержится в исследуемом материале);

— высокая чувствительность метода (достаточно для диагностики наличия 1—5 копий
возбудителя в пробе).


Обнаружение вируса гепатита С






Не нашли, что искали? Воспользуйтесь поиском:

vikidalka.ru - 2015-2024 год. Все права принадлежат их авторам! Нарушение авторских прав | Нарушение персональных данных