Главная | Случайная
Обратная связь

ТОР 5 статей:

Методические подходы к анализу финансового состояния предприятия

Проблема периодизации русской литературы ХХ века. Краткая характеристика второй половины ХХ века

Ценовые и неценовые факторы

Характеристика шлифовальных кругов и ее маркировка

Служебные части речи. Предлог. Союз. Частицы

КАТЕГОРИИ:






Схема розведення гемолізину




Основне розведення гемолізину 1:100, см3 Фізіологічний розчин, см3 Одержане розведення гемолізину
0,2 0,8 1:500
0,1 0,9 1:1000
0,1 1,4 1:1500
0,1 1,9 1:2000
0,1 2,4 1:2500
0,1 2,9 1:3000

Після чого по 0,2 м3 кожного розведення переносять в ряд пробірок, в кожну пробірку добавляють по 0,2 см3 комплементу в розведенні 1 : 20, 0,2 см3 2,5% суміші еритроцитів і 0,4 см3 фіз. р-ну. Штатив з пробірками струшують і ставлять на 10 хв. у водяну баню при температурі 37 ‑ 38° С. Титром гемолізину вважають найбільше його розведення, при якому спостерігається повний гемоліз еритроцитів.

Приготування гемолітичної системи. Гемолітичну систему готують змішуванням в рівних об’ємах, 2,5 % суміші еритроцитів барана та гемолітичної сироватки (гемолізин у подвоєному титрі).

Наприклад, при титрі гемолізину 1:1000 беруть 2:1000, тобто для приготування 100 см3 гемолізину беруть 0,2 см3 гемолізину з ампули і розводять в 99,8 см3 фізіологічного розчину. Отримані 100 см3 розчину гемолізину змішують з 100 см3 суміші еритроцитів. Гемолітичну систему поміщають на 20 хвилин у водяну баню при температурі 37 – 38 °С для сенсибілізації еритроцитів.

Титрування комплементу. Перед постановкою головного дослідження проводять титрування комплементу у бактеріолітичній системі з позитивною сапною і негативною сироватками та 1–2 сироватками з досліджуваної партії.

Позитивну, негативну сироватку та сироватку з партії розводять 1 : 10 фізіологічним розчином (1 см3 сироватки та 9 см3 фізіологічного розчину) та інактивують за температурі 60–62° С протягом 30 хв. і розливають по 0,2 см3 в два ряди по десять пробірок.

Відбирають необхідну для даного об’єму досліджень кількість ампул (флаконів) з комплементом, розчиняють препарат у фізіологічному розчині, кількість якого вказана на ампулі (флаконі), зливають в одну ємність і перемішують. Таким чином отримують основний розчин комплементу, який зберігають в холодильнику протягом постановки реакції. З цього розчину готують розведення 1 : 20 для титрування.

Для розведення комплементу беруть додатковий ряд пробірок, в яких готують попереднє розведення комплементу, але об’єм збільшують в 10 раз. Потім дозатором переносять по 0,2 см3 розведеного комплементу у всі пробірки кожного ряду і вносять інші інгредієнти, як вказано в таблиці 2.

Титром комплементу в бактеріолітичній системі вважають мінімальну його кількість, яка необхідна для повного гемолізу суспензії еритроцитів в пробірках з негативною та досліджуваними сироватками з антигеном і без антигену, а також в пробірках з позитивною сироваткою без антигену протягом 20 хв. у водяній бані при 37–38°С та затримку гемолізу в пробірках з сапною сироваткою і антигеном.

Таблиця 2




Не нашли, что искали? Воспользуйтесь поиском:

vikidalka.ru - 2015-2019 год. Все права принадлежат их авторам! Нарушение авторских прав | Нарушение персональных данных