Цитогенетический метод.

Цитогенетический метод основан на микроскопическом исследовании хромосом –

· кариотипа (индивидуального набора хромосом в норме, а также при геномных и хромосомных мутациях)

· полового хроматина

Позволяет выявлять

1. геномные мутации:

а) полиплоидии,

б) анеуплоидии – трисомии 2п + 1 (с. Дауна, Эдварса, Патау, Клайнфельтера),

- моносомии 2п – 1 (Тернера - Шерешевского),

- нулисомии 2п – 2

в) мозаицизм 46/45 хромосом в группах клеток

1. хромосомные абберации – транслокации (с. Дауна), делеции (с. «Кошачьего крика», Вольфа - Хиршхорна)
2. микрохромосомные перестройки при моногенных синдромах (филадельфийская хромосома - делеция 21 хромосомы – миелолейкоз - белокровие)

Этапы цитогенетического метода:

• подбор клеточного материала,
• культивирование соматических клеток на искусственных питательных средах (клетки человека быстро размножаются на питательных средах)
• добавление ФГА - фитогемагглютинина – стимулятора митоза,
• добавление колхицина – мутагена разрушающего веретено деления во время митоза, для остановки митоза на стадии метафазы
• обработка клеток гипотоническим раствором, вследствие хромосомы набухают, рассыпаются и лежат свободно
• окрашивание хромосом
• изучение под микроскопом, фотографирование
• вырезание и построение идеограммы

Основные сведения о морфологии хромосом человека получены при изучении их в метафазах митоза прометафазе-метафазе мейоза. При этом важно, чтобы количество делящихся клеток, было достаточно велико.

Не нашли, что искали? Воспользуйтесь поиском: