АНАЛИЗ КЛЕТОЧНОГО ЦИКЛА КЛЕТОК КОСТНОГО МОЗГА ПО СОДЕРЖАНИЮ ДНК

Исследование позволяет дифференцировать клетки костного мозга по фазам синтеза ДНК (стадии Gl, S, G2+m). Большинство клеток костного мозга делятся через разные про­межутки времени. Отрезок времени между концом одного митоза и концом следующего на­зывается клеточным циклом. Весь цикл распадается на две части: процесс деления (митоз) и подготовка к нему (интерфаза). Удвоение ДНК происходит в интерфазе, причем начинается задолго до митоза и заканчивается также до его начала. Период синтеза ДНК называется S-периодом; промежуток между окончанием митоза и началом S-периода называется Gl-ne-риодом, промежуток между окончанием S-периода и началом митоза — С2-периодом. В ин­терфазы происходит удвоение не только ДНК, но и всей массы клетки. Рост клетки идет в течение всех периодов интерфазы, но особенно быстро — во второй ее половине — в S- и С2-периодах. В это время очень интенсивно синтезируются РНК и белок. К началу митоза синтетические процессы замирают и возобновляются в следующей интерфазе.

Таблица 7.39. Параметры клеточного цикла миелокариоцитов при различной патологии

[Шмаров Д.А., 1997]

Большинство специализированных клеток костного мозга либо не делятся совсем, либо делятся чрезвычайно редко и не находятся в митотическом цикле. Теоретически выход кле­ток из митотического цикла возможен в любой период интерфазы (Gl, S и G2), но практи­чески абсолютное большинство выходят из стадии G1. Выход из цикла может быть обрати­мым (под воздействием каких-то факторов клетка может приступить к синтезу ДНК и разде­литься, например, лимфоциты периферической крови входят в цикл и делятся под воздейст­вием ФГА) или необратимым (гранулоциты крови при гемобластозах). Клетки костного мозга, которые находятся в митотическом цикле, могут проходить его с различной скорос­тью. Быстрее всего его проходят клетки-предшественницы зрелых форм (у морфологически недифференцируемых клеток-предшественниц гемопоэза цикл составляет около 8 ч). Опре­деление содержания ДНК в каждой клетке клеточной суспензии позволяет получить распре­деление клеток по различным фазам клеточного цикла.

Анализ клеток костного мозга проводят с использованием ДНК-специфических красите­лей, возбуждающихся в ультрафиолетовой области. Выявление самых незначительных разли­чий во флюоресценции позволяет идентифицировать анеуплоидные, а также активно проли-ферирующие клетки. По соотношению делящихся и специализированных клеток в костном мозге можно судить о состоянии костного мозга, а у больных с гемобластозами заблаговремен­но предсказывать развитие бластного криза. Изучение митотического цикла клеток костного мозга по содержанию ДНК позволяет выявлять клетки метастатических новообразований,

диагностировать и следить за течением гемобластозов, оценивать функциональное состояние костного мозга. Наиболее оптимальную информацию о состоянии костного мозга можно по­лучить при одновременном анализе содержания ДНК в клетках костного мозга и определении антигенов на оболочке этих клеток с помощью моноклональных антител к различным антиге­нам, экспрессируемым той или иной популяцией клеток костного мозга. Параметры клеточ­ного цикла миелокариоцитов при различной патологии представлены в табл. 7.39.

Анализ цикла клеток костного мозга с целью выявления ДНК проводят для диагностики бластных кризов при лимфопролиферативных заболеваниях, дифференциальной диагности­ки анемий, а также для выявления патологии созревания и дифференцировки клеток кост­ного мозга.

Не нашли, что искали? Воспользуйтесь поиском: