Желточно-солевой агар

(ЖСА) - элективная для стафилококков среда. Высокое содержание натрия хлорида подавляет большинствобактерий, к-рые встречаются в ассоциациях со стафилококком, а присутствие яичного желтка выявляетсвойственный этому роду фермент лецитиназу. Для изготовления ЖСА к стерильному, расплавленному иохлажденному до 48°С МПА (рН 7,2 -7,4) с 7,5- 10% натрия хлорида добавляют 15- 20% по объемустерильной желточной эмульсии (из хорошо вымытого и обожженного спиртом яйца извлекают желток иразбивают его в 150 - 200 мл стерильного физраствора). Среду быстро перемешивают и разливают в чашкиПетри. В одном из вариантов вместе с эмульсией желтка вливают 20% обезжиренного стерильного молока(МЖСА).

Стафилококки могут находиться в воздухе операционных перевязочных, родильных палат и других больничных помещений. Для их обнаружения делают посевы воздуха на желточно-солевой агар. 
    Нетребовательны к питательным средам, хорошо растут на простых средах, дают пигментные колонии. Элективной средой для стафилококков является желточно-солевой агар, реже — молочно-солевой агар.  На 2-й день изучают выросшие колонии стафилококки образуют выпуклые, ровные непрозрачные колонии средней величины белого,лимонно-желтого или золотистого цвета (гемолитические или негемолитические). Пигментообразование лучше заметно на молочно-солевом агаре. На желточно-солевом агаре большая часть патогенных стафилококков вызывает лецитиназную (ле-цитовителлазную) реакцию, проявляющуюся в образовании вокруг колонии зоны помутнения с радужным венчиком в отраженном свете. При микроскопии в мазках обнаруживают грамположительные кокки, расположенные гроздьями. 

Вопрос 27

Реакция преципитации в геле (агаре). Чашки заливают агаром, в котором вырезают несколько луночек на равном расстоянии друг от друга. В центральную лунку вносят сыворотку, содержащую антитела, в остальные — различные испытуемые антигены или один и тот же антиген в различных разведениях. При диффузии реагентов в агаре в зонах оптимальных соотношений на месте встречи антигена и антител образуются мутные полосы —дуги преципитации (рис. 58).

В случае постановки реакции преципитации с различными разведениями антигена можно установить титр преципитиру-ющей сыворотки—максимальное разведение антигена, которое дает преципитацию с данной сывороткой. Одна из разновидностей реакции преципитации в геле позволяет определять токсигенность исследуемых бактерий (например, дифтерийной палочки) с помощью антитоксической сыворотки. Для этого в чашку Петри на питательную среду помещают полоску стерильной фильтровальной бумаги, пропитанную антитоксической противодифтерийной сывороткой. Затем чашку подсушивают в термостате и засевают испытуемыми культурами в виде штрихов, перпендикулярных к полоске бумаги, на расстоянии 0,6-0,8 см от ее края. В качестве контроля используют заведомо токсигенную культуру. Чашки инкубируют при 37°С в течение суток. При наличии токсигенной культуры в месте взаимодействия токсина с антитоксином образуются линии преципитации в виде дуг (рис. 59).

Не нашли, что искали? Воспользуйтесь поиском: