Занятие 10 - Нуклеиновые кислоты

Цельзанятия: изучить структуру нуклеиновых кислот

Большая часть нуклеиновых кислот в клетках встречается в виде комплексов с основными белками. Такие комплексы называют нуклеопротеидами. Для изучения компонентов нуклеопротеидов удобно использовать растительный объект – пекарские дрожжи, содержащие рибонуклеопротеиды (РНП). В результате кислотного гидролиза РНП распадаются на составляющие их компоненты: пуриновые и пиримидиновые основания; рибозу; фосфорную кислоту; пептиды.

1. Выделение нуклеиновых кислот из дрожжей

Ход работы. В пробирку помещают 1 г свежих пекарских дрожжей, наливают 8 мл 10 % р-ра Н₂SO₄. Пробирку закрывают пробкой, в которую вставлен обратный холодильник (стеклянная трубка длиной 20-30 см), и ставят на водяную баню на 35 минут. Гидролизат после охлаж­дения отфильтровывают и используют для проведения качественных реакций.

2. Определение в составе фосфорной кислоты молибденовым реактивом

Принцип реакции: Фосфорная кислота образует с молибденовым реактивом (раствор молибдата аммония в азотной кислоте) желтый кристаллический осадок фосфорномолибденовокислого аммония:

H₃PO₄ +12(NH₄)₂MoO₄ +21HNO₃ ® (NH₄)₃PO₄ ^. 12MoO₃¯ +21NH₄NO₃ +12H₂О

Ход работы: К 1 мл гидролизата прибавляют 1 мл молибденового реактива и помещают на 10 минут на водяную баню. В присутствии фосфорной кислоты появляется желтое окрашивание. При охлаждении выпадает желтый кристаллический осадок комплексного соединения.

3. Определение в гидролизате рибозы

Ход работы: К 0,5 мл гидролизата дрожжей добавляют 1 мл 30 % р-ра NaOH и 3 капли 7 % р-ра CuSO₄. Пробирку нагревают до кипения. Происходит окисление рибозы и выпадает желтый осадок CuOH или красный осадок Cu₂O в результате восстановления Cu²⁺ до Cu⁺.

Ход работы: К 0,5 мл гидролизата добавляют 1 мл 10 % раствора NaOH и 0,5 мл 1% раствора CuS0₄. Наблюдают появление окраски.

5. Определение пуриновых оснований

К 1 10 каплям гидролизата добавляют 1 каплю концентрированного раствора аммиака для нейтрализации и 5 капель 1% раствора азотнокислого раствора серебра. При стоянии выпадает рыхлый осадок бурого цвета, обусловленный образованием серебряных соединений пуриновых оснований.

Задание: Зарисовать формулу первичной и вторичной структуры ДНК, устно рассказать, показать типы химических связей в молекуле.

Не нашли, что искали? Воспользуйтесь поиском: