Исследование некоторых свойств мочевой кислоты

У ряда животных (человекообразные обезьяны, птицы, рептилии, тутовый шелкопряд) и человека конечным продуктом распада пуриновых оснований является мочевая кислота, которая выводится из организма с мочой. Таким образом, содержание мочевой кислоты в крови и моче отражает интенсивность расщепления нуклеиновых кислот в организме. Если принимать специальную беспуриновую диету, то по выделению мочевой кислоты с мочой, можно судить об обмене эндогенных пуринов.

Мочевая кислота - плохо растворимое в воде соединение, поэтому нормальные концентрации ее в жидких средах приближаются к пределу растворимости. Повышение ее содержания в крови – гиперурикемия – вызывает отложение в виде кристаллов урата натрия в тканях, особенно при местном снижении рН среды. Заболевание, сопровождающееся отложением уратов в суставах, почках, называется подагрой. Оно широко распространено, особенно у мужчин. Иногда к подагре приводит врожденная, частичная или полная недостаточность фермента, участвующего в повторном использовании свободных оснований в синтезе нуклеотидов. Препараты, снижающие образование мочевой кислоты при окилении пуринов или стимулирующие выведение ее почками, облегчают течение подагры.

Материалы, реактивы, оборудование. Мочевая кислота (кристаллы), 10% раствор едкого натра, 1% раствор сернокислой меди, концентрированная азотная кислота, раствор аммиака, раствор едкого калия; пробирки, пипетки, спиртовка, водяная баня, фарфоровые чашки.

1.Растворимость мочевой кислоты. Поместить несколько кристалликов мочевой кислоты в пробирку, прибавить дистиллированной воды и нагреть, при этом заметного растворения не происходит.

Добавить около 1 мл раствора едкого натра и продолжать нагревать. Отмечаем растворение мочевой кислоты в щелочи.

2. Окисление мочевой кислоты. Несколько кристалликов мочевой кислоты поместить в пробирку, добавить 2-3 мл раствора 10 % едкого натра и по каплям 1% раствор сернокислой меди до образования зеленоватой мути мочекислой окиси меди. Слегка нагреть и отметить образование белого осадка мочекислой закиси меди. Добавить еще несколько капель раствора сернокислой меди, довести до кипения. Наблюдаем образование красного осадка закиси меди.

3. Мурексидная реакция. Мурексидная реакция основана на том, что при окислении мочевой кислоты азотной кислотой среди продуктов окисления образуется аллоксантин, перегруппировывающийся в пурпурную кислоту, аммонийная соль (мурексид) окрашивается в пурпурно-красный цвет. Калийная соль пурпуровой кислоты окрашивается в сине-фиолетовый цвет.

1-2 кристаллика мочевой кислоты облить в фарфоровой чашке несколькими каплями концентрированной азотной кислоты и осторожно досуха выпарить на огне /под тягой/.

По остыванию красный или желтый осадок /аллоксантин/ смочить аммиаком. Получается красивое пурпурное окрашивание. Такую же пробу проделать, добавляя не аммиак, а раствор едкого калия. Наблюдается сине-фиолетовое окрашивание.

Вопросы к семинару по модулю «Обмен нуклеиновых кислот»

1. Строение нуклеотидов.

2. Особенности строения РНК и ДНК.

3. Распад нуклеиновых кислот в тканях.

4. Нуклеазы \эндо-, экзонуклеазы, 3-эндонуклеазы, 5-эндонуклеазы.

5. Рестриктирующие эндонуклеазы бактерий. Их роль в генной инженерии.

6. Распад пуриновых и пиримидиновых оснований.

7. Синтез пуриновых и пиримидиновых оснований.

8. Процесс репликации и его значение в механизмах передачи наследственной информации.

9. Полуконсервативный способ репликации ДНК.

10. Ферменты репликации ДНК-зависимые-ДНК-полимеразы (1, 2, 3). Экзонуклеазная активность ДНК-полимеразы 1,2.

11. Реплисома - репликационная система, осуществляющая синтез полинуклеотидных цепей ДНК.

12. Последовательные этапы репликации:

-узнавание точки начала репликации;

-образование репликационной вилки;

-расплетение двойной спирали;

-синтез полинуклеотидных цепей.

13. Особенности репликации у прокариот и эукариот.

14. Транскрипция (биосинтез РНК) и её значение в механизмах передачи наследственной информации.

15. ДНК-зависимая РНК-полимераза. Строение фермента, механизм действия.

16. Посттранскрипционный процессинг различных видов РНК.

17. Гетерогенные ядерные РНК-предшественники эукариотических матричных РНК.

18. Малые ядерные РНК. Особенности строения и функции.

19. РНК-зависимая ДНК-полимераза (обратная транскриптаза). Обратная транскрипция.

20. Генная инженерия.

Не нашли, что искали? Воспользуйтесь поиском: